影響凝膠色譜圖的重要因素
由實(shí)驗得到的凝膠色譜圖，再結合標定線(xiàn)進(jìn)行分子量分布的計算。因而必須保持標定色譜柱和測定試樣對實(shí)驗條件的一致性，否則將會(huì )引起譜圖的位置、形狀、寬度的變化導致計算結果的誤差。另外實(shí)驗條件本身選擇不合適也會(huì )影響色譜圖。
　　a ．流速
　　目前，凝膠色譜實(shí)驗中，一般直接記錄譜圖的淋出體積（或保留時(shí)間）作為計算參數。流速的變化將直接影響譜圖的淋出體積，1％的流速變化會(huì )引起分子量的誤差達8％。因此，要求輸液泵流速穩定在1％以?xún)�。同樣�?a href="http://www.d5tw3.cn/class36.html">記錄儀紙速恒定也很重要，需恒定在0.2％以?xún)取?
　　b ．進(jìn)樣濃度
　　凝膠色譜圖與進(jìn)樣濃度有關(guān)，隨著(zhù)進(jìn)樣濃度的增加，色譜圖后移，變寬甚至出現多峰。當分子量愈大，溶劑愈良好，流速愈大，分布愈寬時(shí)，色譜圖的濃度依賴(lài)性表現愈明顯。一旦譜圖有了濃度依賴(lài)性，其后果是：所計算的分子量偏小，分布變寬、分離效率變差。因此配制高分子溶液時(shí)，在檢測器靈敏度允許范圍內應盡可能低。當采用示差檢測器時(shí)，濁度計| 色度計| 粘度計| 折射計| 滴定儀| 密度計| 熱流計| 濃度計| 折射儀| 采樣儀| 如高分子與溶劑的折光指數差很小，必須配制較高濃度才能得到足夠的信號，這時(shí)為了消除濃度對峰位的影響，可采用不同濃度進(jìn)樣，然后，以峰位對濃度作圖，求得外推濃度至零時(shí)的峰值。此法只適用于低分子量（M < 5×105），因為在高分子量高濃度時(shí)，峰值對濃度作圖為非線(xiàn)性的。
　　在凝膠色譜實(shí)驗中還有一個(gè)導致譜圖后移的是由大分子降解引起。當大分子流經(jīng)色譜柱時(shí)由于剪切作用產(chǎn)生降解，它隨流速增加而增加，故是機械降解。影響降解的因素很多，當分子量愈大、濃度愈高、溶劑性能愈差、色譜柱填料愈細、降解愈嚴重。為了消除色譜圖的濃度依賴(lài)性，有人曾采用θ溶劑，但從降解的角度來(lái)看是非常不利的。因此，對高分子量聚合物需綜合選擇實(shí)驗條件，盡可能選低濃度、低流速以確保結果的可靠。