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磁式細胞分選器簡(jiǎn)介

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磁式細胞分選器簡(jiǎn)介
FCM雖然是分離復雜細胞群中特定細胞的有效方法,但也有細胞處理量小,含量低于10-4的痕量細胞不能分離,并且費用較高等不足之處。目前市場(chǎng)上出現T 一種稱(chēng)為磁式細胞分選器(magnetic activated cell sorting , MACS)的裝置,可作為細胞分析的預富集手段或FCM替代產(chǎn)品,價(jià)格便宜,使用方便,適宜于小型實(shí)驗室配置使用。下圖分別是MACS的外形和分選工作原理。




  MACS的分離效果已經(jīng)得到了免疫熒光、PCR、FISH及FCM的確認,其原理是通過(guò)抗體對細胞膜表面抗原的特異性識別,將偶聯(lián)在抗體上的磁珠標記在細胞上,再在外在磁場(chǎng)作用下以正選或負選方式選擇性地分離細胞。其分離策略可以敘述如下。  滴定儀| 密度計| 熱流計| 濃度計| 折射儀| 采樣儀|
  1 .磁珠標記
  將帶有磁珠的抗體快速和目的細胞的特殊表面抗原結合上去。
  2 .過(guò)柱分離
  將處理過(guò)的細胞樣品流經(jīng)MACS分離柱,未經(jīng)標記的細胞流出分離柱(負選),而標記上磁珠的目的細胞則被外加磁場(chǎng)吸附在柱內。
  3 .洗脫細胞
  撤去外加磁場(chǎng)洗脫收集柱內的細胞,即為正選的目的細胞。
  此法的的特點(diǎn)及優(yōu)點(diǎn)是適應細胞種類(lèi)廣,既可用于收集高含量的細胞也可用于富集痕量細胞(如抗原特異的B細胞、母親血液中的胎兒細胞、外周血中的造血干細胞和血液中的腫瘤細胞等),分離純度可高達95%~99%,細胞處理量可高達109。而最大優(yōu)點(diǎn)是磁珠不會(huì )影響細胞活力。其原因是MACS磁珠直徑僅50nm,相當于一個(gè)病毒粒子大小,只有真核細胞的百萬(wàn)分之一。更為重要的是,MACS磁珠能形成穩定的膠體溶液,在磁場(chǎng)中既不沉淀,也不聚合,而且作為磁珠成分的鐵氧化物和多糖能被細胞所降解,使細胞保持生理活性。細胞分離后磁珠一也無(wú)需去除。
  細胞分選可以是正選、負選或正負選結合。正選就是讓目的細胞帶上磁珠,直接分離而得,此法快速也相對省錢(qián);負選就是讓非目的細胞帶上標記,收集未標記細胞。負選一般只在無(wú)適當抗體或抗體會(huì )影響細胞時(shí)才采用。正負選結合方法適用于分離細胞數極少或含有與其他非目的細胞相同表面抗原的細胞。
發(fā)布人:2010/12/31 10:06:003413 發(fā)布時(shí)間:2010/12/31 10:06:00 此新聞已被瀏覽:3413次