紫外可見(jiàn)分光光度計的常見(jiàn)故障和使用經(jīng)驗
一．光源部分：
（1）故障：鎢燈不亮；
原因：鎢燈燈絲燒斷（此種原因幾率最高）；
檢查：鎢燈兩端有工作電壓，但燈不亮；取下鎢燈用萬(wàn)用表電阻檔檢測。
處置：更換新鎢燈； 

    （2）故障：鎢燈不亮；
原因：沒(méi)有點(diǎn)燈電壓；
檢查：保險絲被熔斷；
處置：更換保險絲，（如更換后再次燒斷則要檢查供電電路）；

    （3）故障：氘燈不亮；
原因：氘燈壽命到期（此種原因幾率最高）；
檢查：燈絲電壓、陽(yáng)極電壓均有，燈絲也可能未斷（可看到燈絲發(fā)紅）；
處置：更換氘燈；

    （4）故障：氘燈不亮；
原因：氘燈起輝電路故障；
檢查：氘燈在起輝的過(guò)程中，一般是燈絲先要預熱數秒鐘，然后燈的陽(yáng)極與陰極間才可起輝放電，假如燈在起輝的開(kāi)始瞬間燈內閃動(dòng)一下或連續閃動(dòng)，并且更換新的氘燈后依然如此，有可能是起輝電路有故障，燈電流調整用的大功率晶體管損壞的幾率最大。
處置：需要專(zhuān)業(yè)人士修理；

    二．信號部分：
（1）故障：沒(méi)有任何檢測信號輸出；
原因：沒(méi)有任何光束照射到樣品室內；
檢查：將波長(cháng)設定為530nm，狹縫盡量開(kāi)到最寬檔位，在黑暗的環(huán)境下用一張白紙放在樣品室光窗出口處，觀(guān)察白紙上有無(wú)綠光斑影像；
處置：檢查光源鏡是否轉到位？雙光束儀器的切光電機是否轉動(dòng)了（耳朵可以聞聲電機轉動(dòng)的聲音）？

    （2）故障：樣品室內無(wú)任何物品的情況下，全波長(cháng)范圍內基線(xiàn)噪聲大；
原因：光源鏡位置不正確、石英窗表面被濺射上樣品；
檢查：觀(guān)察光源是否照射到進(jìn)射狹縫的中心？石英窗上有無(wú)污染物？
處置：重新調整光源鏡的位置，用乙醇清洗石英窗；

    （3）故障：樣品室內無(wú)任何物品的情況下，僅僅是紫外區的基線(xiàn)噪聲大；
原因：氘燈老化、光學(xué)系統的反光鏡表面劣化、濾光片出現結晶物；
檢查：可見(jiàn)區的基線(xiàn)較為平坦，斷電后打開(kāi)儀器的單色器及上蓋，肉眼可以觀(guān)察到光柵、反光鏡表面有一層白色霧狀物覆蓋在上面；假如光學(xué)系統正常，最大的可能是氘燈老化，可以通過(guò)能量檢查或更換新燈方法加以判定；
處置：更換氘燈、用火棉膠粘取鏡面上的污物或用研磨膏研磨濾光片（留意：此種技巧需要有一定維修經(jīng)驗者來(lái)實(shí)施）；

    （4）故障：樣品室放進(jìn)空缺后做基線(xiàn)記憶，噪聲較大，紫外區尤甚；
原因：比色皿表面或內壁被污染、使用了玻璃比色皿或空缺樣品對紫外光譜的吸收太強烈，使放大器超出了校正范圍；
檢查：將波長(cháng)設定為250nm，先在不放任何物品的狀態(tài)下調零，然后將空比色皿插進(jìn)樣品道一側，此時(shí)吸光值應小于0.07Abs；假如大于此值，有可能是比色皿不干凈或使用了玻璃比色皿；同樣方法也可判定空缺溶液的吸光值大��；
處置：清洗比色皿，更換空缺溶液；

    （5）故障：吸光值結果出現負值（最常見(jiàn)）；
原因：沒(méi)做空缺記憶、樣品的吸光值小于空缺參比液；
檢查：將參比液與樣品液調換位置便知；
處置：做空缺記憶、調換參比液或用參比液配置樣品溶液；

    （6）故障：樣品信號重現性不良；
原因：排除儀器本身的原因外，最大的可能是樣品溶液不均勻所致；在簡(jiǎn)易的單光束儀器中，樣品池架一般為推拉式的，有時(shí)重復推拉不在同一個(gè)位置上；
檢查：更換一種穩定的試樣判定；
處置：采取正確的試樣配置手段；修理推拉式樣品架的定位碰珠；

    （7）故障：做基線(xiàn)掃描或樣品掃描時(shí)，基線(xiàn)或信號有一個(gè)大的負脈沖；
原因：掃描速度設置得過(guò)快，信號在讀取時(shí)，誤將濾光片或光源鏡的切換當做信號讀取了；
檢查：改變掃描速度； 

    （8）故障：做基線(xiàn)掃描或樣品掃描時(shí)，基線(xiàn)或信號有一個(gè)長(cháng)時(shí)間段的負值或滿(mǎn)屏大噪聲；
原因：濾光片飼服電機“失步”，造成檔位錯位，國產(chǎn)電機尤甚；
檢查：重新開(kāi)機有可能回復，或打開(kāi)單色器對照波長(cháng)與濾光片的相對位置來(lái)檢查（留意：打開(kāi)單色器時(shí)要保護檢測器不被強光刺激）；
處置：更換飼服電機；

    （9）故障：樣品出峰位置不對；
原因：波長(cháng)傳動(dòng)機構產(chǎn)生位移；
檢查：通過(guò)氘燈的656.1nm的特征譜線(xiàn)來(lái)判定波長(cháng)是否正確；
處置：對于高檔儀器而言處理手段相對簡(jiǎn)單，使用儀器固有的自動(dòng)校正功能即可；而對于相對簡(jiǎn)單的儀器，這種調整則需要專(zhuān)業(yè)職員來(lái)進(jìn)行了；

    （10）故障：信號的分辨率不夠，具體表現是：本應疊加在某一大峰上的小峰無(wú)法觀(guān)察到；
原因：狹縫設置過(guò)窄而掃描速度過(guò)快，造成檢測器響應速度跟不上，從而失往應測到的信號；按常理，一定的狹縫寬度要對應一定范圍的掃描速度；或者狹縫設置得過(guò)寬，使儀器的分辨率下降，將小峰融合在大峰里了。
檢查：放慢掃描速度看一看或將狹縫設窄；
處置：將掃描速度、狹縫寬窄、時(shí)間常數三者擬合成一個(gè)最優(yōu)化的條件；

    （11）故障：當儀器波長(cháng)固定在某個(gè)波長(cháng)下時(shí)，吸光值信號上下擺動(dòng)，特別是丈量模式轉換為按鍵開(kāi)關(guān)式的簡(jiǎn)易儀器；
原因：開(kāi)關(guān)觸點(diǎn)因長(cháng)期氧化所致造成接觸不良；
檢查：用手加重氣力按琴鍵時(shí)，吸光值隨之變化；
處置：用金屬活化劑清洗按鍵觸點(diǎn)即可；

    （12）故障：儀器零點(diǎn)飄忽不定，主要反映在簡(jiǎn)易儀器上；
原因：在簡(jiǎn)易儀器中，零點(diǎn)往往是通過(guò)電位器來(lái)調整，這種電位器一般是炭膜電阻制作的，使用久了往往造成接觸不良；
處置：更換電位器； 測厚儀| 測速儀| 轉速表| 壓力表| 壓力計| 真空表| 硬度計| 探傷儀| 電子稱(chēng)| 熱像儀| 頻閃儀|

使用經(jīng)驗
 1、幾乎所有的光譜分析儀器(如紫外可見(jiàn)分光光度計、原子吸收分光光度計、一些儀器光度檢測器)都是依據的朗伯-比耳定律。  
2、很多藥品要求相對誤差在1%以?xún)取?nbsp;
3、若石英比色皿QC的配對誤差為0.1%T，則給使用者帶來(lái)的分析誤差(△A/A)為0.5%。若QC的配對誤差為0.5%，則分析誤差為3%。 
4、檢驗石英比色皿QC的配對誤差時(shí)，QC中應裝滿(mǎn)蒸餾水或溶劑。
5、用超聲波清洗比色皿時(shí)，一般用20W的清洗玻璃儀器的超聲波清洗30分鐘，就能解決題目，但盡不能用大功率超聲波來(lái)清洗比色皿，會(huì )損壞比色皿，特別是對那些用黏結方法制作的比色皿。 
6、分析測試時(shí)，注進(jìn)比色皿的溶液不要太滿(mǎn)，一般到比色皿高度的2/3即可。
7、一般的光電檢測器如硅光電池、光電管、光電倍增管有疲憊效應，應避免長(cháng)時(shí)間照射、預熱時(shí)，打開(kāi)樣品室蓋，防止光電檢測器受光疲憊。 
 8、A.owen在1988年指出：“吸光度丈量的正確度，取決于儀器的SBW與試樣的自然帶寬NBW的比率。SBW/NBW≤0.1時(shí),吸光度正確度可高達99.5%。NBW≥20nm時(shí)，2nm的SBW對于吸光度的正確度測試是足夠的，可滿(mǎn)足大約99%的日常應用�！�
9、我國藥典規定，用于藥檢的紫外可見(jiàn)分光光度計的SBW一定要求≤2nm。
10、光譜帶寬以nm計，狹縫寬度以mm計。
11、波長(cháng)正確度在某種程度上，決定光度正確度。
12、噪聲限制紫外可見(jiàn)分光光度計對樣品分析濃度的下限，并直接影響儀器的信噪比。雜散光直接限制被分析測試樣品濃度的上限。
13、雜散光對參比光束和樣品光束的影響是相同的。
14、在要求較高的分析測試工作中，紫外可見(jiàn)分光光度計的雜散光應優(yōu)于0.05%，這樣可保證儀器有較寬的線(xiàn)性動(dòng)態(tài)范圍。
15、W.slavin以為，雜散光通常在紫外區。實(shí)際測試時(shí)，應檢測整個(gè)光譜區的兩個(gè)端點(diǎn)的雜散光。
16、紫外可見(jiàn)分光光度計的光度噪聲與掃描速度有很大關(guān)系。一般來(lái)講，掃描速度快的紫外可見(jiàn)分光光度計的噪聲也大。
17、紫外可見(jiàn)分光光度計的基線(xiàn)平直度是指每個(gè)波長(cháng)上的光速噪聲。測基線(xiàn)平直度時(shí)，掃描速度用慢速。
18、紫外可見(jiàn)分光光度計的線(xiàn)性動(dòng)態(tài)范圍取決于儀器的雜散光與噪聲。
19、在常規分析中，對大多數試樣濃度大多取10～100ug/ml，相當0.3～0.7Abs左右最佳。在試樣量答應時(shí)，試樣應選擇靠近最佳吸光度值(0.434Abs)的濃度。
20、為了得到更好的光度正確度，在分析過(guò)程中，特別要留意選擇試樣的最大吸收峰處的波長(cháng)作為測試波長(cháng)。
21、選擇光譜帶寬的原則是，在一定的實(shí)驗條件下，測試吸光度隨光譜帶寬的變換，以獲得最大吸光度值的光譜帶寬作為欲選擇的光譜帶寬。
22、判定被測試樣是否有光解現象，首先要看測試數據的變化規律，對同一個(gè)試樣多次丈量，看其吸光度值是否都是向同一個(gè)方向變化，假如是，就可能有光解現象。