保健食品中B族維生素及咖啡因含量的測定方法
1、試劑 
　　1.1甲醇分析純。
　　1.2磷酸分析純。
　　1.3乙腈色譜純。
　　1.4硫酸月桂脂鈉（SodiumDodecylsulfate）、1－癸烷磺酸鈉（Sodium1－Decanesulfonate）液相色譜用。 分析儀| 溶氧計| 電導度計| PH計| 酸堿計| 糖度計| 鹽度計| 酸堿度計| 電導計| 水分測定儀| 濁度計|
　　1.5標準溶液準確稱(chēng)重已測定水分的鹽酸硫胺素（VB1）和鹽酸吡哆醇（VB6）標準品各0.0500g，溶于水中，準確配成50ml溶液。此溶液為標準溶液A。準確稱(chēng)量已測定水分的煙酰胺和煙酸標準品0.0400g，溶于水中，準確配成20ml溶液。此溶液為標準溶液B。準確稱(chēng)量經(jīng)80℃干燥4h的咖啡因0.0500g，準確加入標準溶液A5ml標準溶液B10ml，再加入甲醇：水：磷酸＝100：400：0.5混合溶液，并稀釋至20ml作為標準溶液，此溶液每ml含VB15μg，VB65μg，煙酸20μg，煙酰胺20μg，咖啡因50μg。
　　2、儀器設備
　　2.1高效液相色譜儀：附紫外檢測器。
　　2.2超聲波清洗器。
　　2.3離心機。
　　3、分析步驟
　　3.1準確稱(chēng)取一定量片劑粉末或膠囊內容物于試管中，加入甲醇：水：磷酸＝100：400：0.5混合溶液，使濃度為每毫升中大約含VB1、、VB60.25mg，煙酸、煙酰胺1mg。超聲提取5min后以3000rpm/min離心5min，上清液經(jīng)0.45μm濾膜過(guò)濾后待進(jìn)樣。
　　3.2液體樣品直接以甲醇：水：磷酸＝100：400：0.5混合溶液稀釋?zhuān)�充分混勻后�?jīng)0.45μm濾膜過(guò)濾后待進(jìn)樣。
　　3.3色譜條件
　　3.3.1色譜柱：TSKC184.6×150ｍｍ
　　3.3.2柱溫：室溫
　　3.3.3檢測波長(cháng)：VB１260ｎｍ
　　3.3.4靈敏度：0.02AUFS
　　3.3.5流動(dòng)相：VB１：硫酸月桂脂鈉溶液（5□530）：乙腈：磷酸＝530：470：1
　　咖啡因、煙酸、煙酰胺、VB6：1-癸烷磺酸鈉溶液（1.22□850）：乙腈：磷酸＝850：150：1
　　3.3.6流速：1ml/min
　　3.3.7進(jìn)樣量：10μL
　　3.3.8色譜分析：量取10μL標準溶液及試樣凈化液注入色譜儀中，以保留時(shí)間定性，以試樣峰高或峰面積與標準比較定量。