薄層色譜法的作用和相關(guān)知識
薄層色譜是化學(xué)的一種分離和分析方法
⑴定性鑒別 化學(xué)上經(jīng)典的定性鑒別,例如經(jīng)典的有機定性分析或經(jīng)典的毒物分析，是利用各種化合物的溶解度不同和所含功能基的不同,用溶劑提取或用試劑處理,把它們分組或分為單一組分,然后作試管反應或點(diǎn)滴反應(顏色反應),或根據它們衍生物的理化性質(zhì)進(jìn)行定性鑒別.這種方法的缺點(diǎn)是樣品用量叫大，分離手續麻煩,分析時(shí)間較長(cháng)(幾小時(shí)或幾時(shí)個(gè)小時(shí)),并可能有雜質(zhì)干擾.,現采用合適的展開(kāi)劑和現色劑在薄層上作為分離和鑒別,根據樣品中組分的 值和現色情況,同時(shí)用標準作對照,一般即能卻證為某一化合物.用薄層色譜法定性,樣品用量小,分離方便，分離時(shí)間短(幾分鐘或幾時(shí)分鐘),檢出靈敏度高. 例如，再毒物分析中檢驗是否巴比妥安眠藥中毒時(shí),取胃內容物或尿樣品，先用鹽酸酸化后,用乙醚提取，乙醚提取液脫水,過(guò)濾蒸干，溶于無(wú)水乙醇中，點(diǎn)在硅膠版上用氯仿 無(wú)水乙醇（36 1）展開(kāi)，用硫酸汞二苯偶碳酰肼試劑顯色，并用標準品對照，意見(jiàn)出巴比妥，苯巴比妥，戊巴比妥和異巴比妥。鑒別速度快（1小時(shí)），這對于搶救中毒患者和及時(shí)為醫生提供治療方案極為重要
（2）藥品的質(zhì)量控制和雜質(zhì)檢查 藥品的純度，通常用熔點(diǎn)，吸光值等物理常數作為鑒定的指標。但是薄層檢查也是藥品質(zhì)量控制和雜質(zhì)檢查的一種有效方法，有時(shí)甚至比一般方法更有效。一些國家的藥典和藥品規范已經(jīng)采用。方法是把一定量得樣品 溶液(例如，相當于 樣品)電在薄層上，用展開(kāi)劑展開(kāi)并顯色，同時(shí)用純品作對照,如果樣品只顯示出純品 值一致的一個(gè)斑點(diǎn),則表示含有雜質(zhì).進(jìn)一步可用薄層作雜質(zhì)的限量檢查.再上例中,如果已經(jīng)知道顯色劑對雜質(zhì)的最小檢出量為 ,在薄層上點(diǎn)樣 后不顯出雜質(zhì)斑點(diǎn),則雜質(zhì)的量低于 ,或低于 ,也就是樣品的純度不低于 . 例如鎦體藥物的合成和精致工作中，常含結構類(lèi)似的雜質(zhì),即按上述方法控制其質(zhì)量和雜質(zhì)的限量.
 ⑶化學(xué)反應進(jìn)程的控制,反應副產(chǎn)物的檢出以及中間體的分析, 在化學(xué)反應進(jìn)行到一定時(shí)間或反應終了時(shí),把反應液取出作薄層分析,可以知道還剩下多少原料藥未起作用.方法是把反應液或其有機溶劑提取液點(diǎn)在薄層上，同時(shí)點(diǎn)原料作參比對照，看薄層上是否出現原料藥斑點(diǎn).還可以用薄層檢查反應副產(chǎn)物.如果化學(xué)反應分步進(jìn)行，則每一步反應的中間體的質(zhì)量和產(chǎn)率也都可用薄層進(jìn)行定性和定量. 例如在合成強力霉素的過(guò)程中，需要中間地甲烯土霉素氫化物為脫氧土霉素.氫化反應是否完全,可用薄層檢查,如果反應完全,則反應釜中幾乎沒(méi)有或只有極少量的甲烯土霉素存在,薄層板上只顯示出一個(gè)脫氧土霉素,如果薄層板上有上下二個(gè)明顯的斑點(diǎn),表示反應還沒(méi)有完全,尚需繼續還原,直到只顯示出脫氧土霉素的一個(gè)斑點(diǎn)為止才能出料.
 (4) 柱色普法分離條件的探索 柱色普法的實(shí)驗條件，例如選用什么吸附劑和洗脫劑較好各個(gè)組分按什么順序從柱中洗脫出來(lái)，每一分洗脫液中是含單一組分或就含幾種沒(méi)有分開(kāi)的組分等，都可以在薄層上進(jìn)行探索和檢驗。薄層上所有的展開(kāi)劑雖不完全照搬柱色普法上，但仍有參考價(jià)值。

相關(guān)知識
1、怎樣提高點(diǎn)樣效率？ 
   點(diǎn)樣是造成TLC定量誤差的主要來(lái)源。
    實(shí)驗證明：定量毛細管更適合較小體積的點(diǎn)樣；微量注射器更適合較大體積的點(diǎn)樣。這主要是因為微量注射器受小氣泡、溶液回爬現象的影響較大。為避免不同定量毛細管理體制的占樣誤差，建議一塊薄層板上最好用同一只定量毛細管。但應注意更換樣品時(shí)，應將毛細管用超聲波或不同極性溶課劑清洗干凈。在制備樣品時(shí)，溶樣溶劑黏度不能過(guò)高，以便于點(diǎn)樣；溶劑沸點(diǎn)過(guò)低則進(jìn)樣體積易變，過(guò)高則會(huì )改變展開(kāi)劑組成；對樣品溶解度過(guò)高會(huì )使樣點(diǎn)發(fā)生空心現象，常用的溶劑為甲醇、乙醇、丙酮。經(jīng)典TLC樣點(diǎn)原點(diǎn)一般為直徑3mm點(diǎn)間距離1-2cm底邊距離1.5cm;HPLC樣點(diǎn)原點(diǎn)一般為直徑1mm點(diǎn)間距5mm底邊距1cm.  水份儀| 分析儀| 溶氧計| 電導度計| PH計| 酸堿計| 糖度計| 鹽度計| 酸堿度計| 電導計| 水分測定儀| 濁度計|
2、展開(kāi)劑的選擇 
   TLC與HPLC相比，一個(gè)突出的優(yōu)點(diǎn)就是流動(dòng)相的選擇具有更大的靈活性，流動(dòng)相的選擇的目的是使絕大部分樣品的Rf值位于0.1－0.7之間并達到較好的分離，與此對應的是流動(dòng)相要有適當的強度和組成。流動(dòng)相強度越大，溶質(zhì)Rf值越大，但很可能降低分離能力；另外單一溶劑很難分離較復雜的混合物、根據相似相溶原理，要使用多元溶劑體系。一般展開(kāi)劑體系選擇如下：根據分離樣品性質(zhì)、薄層色譜板性質(zhì)選擇一個(gè)二元溶劑體系，通過(guò)調節溶劑比例以尋求適合Rf值，適合的Rf值找到后，再尋求極性參數相同的二元溶劑體系兩個(gè)，以這三個(gè)組成為三點(diǎn)組成一個(gè)三角形，則可看到：三角形頂點(diǎn)是二元體系，邊是三元體系，三角形內是四元體系，并且極性一致，可根據幾何原理得出任一點(diǎn)組成，這種方法較為直觀(guān)，也較簡(jiǎn)單。   
3、TLC的通用顯色方法
    理想的顯色希望靈敏度高，斑點(diǎn)顏色穩定、斑點(diǎn)與背景間的對比度好，斑點(diǎn)的大小及顏色的深度與物質(zhì)的量成正比，在樣品組成并不完全已知的情況下，通用顯色方法顯得尤為重要，通用顯色方法主要有：
    1、紫外照射法：方便、不破壞樣品；
    2、碘蒸氣法：通用性強，與紫外法結合靈敏度高于該兩法單獨使用；
    3、熒光試劑：制造熒光背景，使原來(lái)紫外下無(wú)熒光物質(zhì)被鑒別，有熒光物質(zhì)更明顯；
    4、硫酸溶劑：對絕大多數有機物有效，但有破壞性。