生物等效性試驗分析方法學(xué)評價(jià)應考慮的幾個(gè)方面
本文主要從準確度、精密度、靈敏度方法、專(zhuān)屬性、線(xiàn)性范圍、樣本的穩定性、方法相關(guān)性等方面提出了對生物等效性試驗分析方法學(xué)評價(jià)的一些認識。

    已有國家標準口服制劑的研發(fā)和申請注冊在目前的申報品種中占據的數量龐大，該類(lèi)藥物一般需要與已上市同類(lèi)品種進(jìn)行生物等效性比較試驗，作為評價(jià)該藥物與已上市品種具有同等內在質(zhì)量的一個(gè)考量指標。體內藥物分析方法學(xué)的評價(jià)對判斷其生物等效性試驗結果的可信性是至關(guān)重要的，現就生物等效性試驗中的分析方法學(xué)評價(jià)談一點(diǎn)我們的意見(jiàn)。 測厚儀| 測速儀| 轉速表| 壓力表| 壓力計| 真空表| 硬度計| 探傷儀| 電子稱(chēng)| 熱像儀|
    體內藥物分析方法學(xué)的評價(jià)應主要對以下指標進(jìn)行考察：
    ：評價(jià)測定結果與真值的符合程度，用回收率表示�；厥章士煞譃榻^對回收率和相對回收率。對不同的實(shí)驗目的，采用不同的回收率評價(jià)指標。
    絕對回收率（又稱(chēng)提取回收率）考察測定結果與“真值”的接近程度，從生物樣本基質(zhì)中回收得到目標物質(zhì)的響應值除以純標準品產(chǎn)生的響應值即為分析物的絕對回收率。應選用高、中、低三種濃度分別進(jìn)行考察，絕對回收率一般要求在50%~80%。
相對回收率（又稱(chēng)方法回收率），從生物樣本基質(zhì)中回收得到目標物質(zhì)的響應值除以加入到生物基質(zhì)中已知量的標準品產(chǎn)生的響應值即為分析物的相對回收率。該評價(jià)指標已扣除了目標藥物在樣品的前處理過(guò)程損失而造成的系統誤差。高、中濃度點(diǎn)測得的相對回收率應在85~115%，低濃度（定量限）應在80~120%。
    在血藥濃度監測、生物利用度研究、藥代動(dòng)力學(xué)參數的確定以及藥物的分布等方面的研究，更關(guān)注的是絕對回收率，而在進(jìn)行生物等效性研究時(shí)更關(guān)注的是相對回收率指標。
    同一均勻樣品多次測定結果之間的接近程度。精密度可分為以下幾種表述方式。不同的表述方式具有不同的含義。
日內（批內）精密度：在同一天、同一批樣品或用同一批試劑、同一條標準曲線(xiàn)測得的精密度，考察的是方法的重復性。
日間（批間）精密度：分析方法在不同時(shí)間測定結果的精密度，考察樣品測定時(shí)儀器的性能、試劑、標準曲線(xiàn)、環(huán)境條件等發(fā)生微小變化而導致測定結果的變異。 
中間精密度：考察隨機變動(dòng)因素對精密度的影響，如不同的操作人員、不同的儀器等對精密度的影響程度。
復現性：不同實(shí)驗室之間的方法精密度。
    一般要求精密度（RSD） 應小于15％，在LOQ 附近的RSD 應小于20％。 
    可檢出藥物的最小量。靈敏度可用以下方式表述：
檢測限（LOD）：LOD=3N/S或以空白背景響應值的3倍作為估計值
定量限（LOQ）：S/N=10或以空白背景響應值的10倍作為估計值。定量限應是標準曲線(xiàn)的下限，應能滿(mǎn)足測定靈敏度的要求，其準確度應在80%~120%，RSD小于20%（n=5）。
最低檢測濃度：LOQ/進(jìn)樣體積
    上述表達的靈敏度均為儀器的靈敏度，實(shí)測樣品的靈敏度還與樣品的取樣量與前處理有關(guān)。
    是考察樣品中存在干擾成分的情況下，分析方法能夠準確、專(zhuān)一地測定分析物的能力。
    1、代謝產(chǎn)物的干擾：可通過(guò)多次給藥后的生物樣本進(jìn)行考察。
    2、內源性物質(zhì)的干擾：可通過(guò)對生物樣品的凈化處理方法來(lái)排除。
    3、其他藥物的干擾：改用具有分離能力或專(zhuān)屬性強的分析方法。
    如采用色譜法時(shí)，空白試驗是最常用的方法，至少應采用6個(gè)不同個(gè)體的空白試驗樣本進(jìn)行考察，并提供相應的色譜圖，以證實(shí)方法的專(zhuān)屬性。
    指一種分析方法的精密度、準確度都符合要求的試驗結果，而且供試物濃度成線(xiàn)性的變化范圍，一般用標準曲線(xiàn)來(lái)描述（注意配制的介質(zhì)）。線(xiàn)性范圍要求覆蓋實(shí)測濃度，包括LOQ，上限為最高濃度的120%，下限為最低濃度的80%。（至少6個(gè)濃度點(diǎn)）；相關(guān)系數γ不低于0.99，同時(shí)符合準確度和精度度要求（偏差小于15%，最低點(diǎn)的偏差小于20%）。評價(jià)時(shí)還應注意標準曲線(xiàn)的截距與鈄率的關(guān)系：截距過(guò)大，可能是有干擾成分或者是線(xiàn)性范圍設置過(guò)寬。
        1、短期室溫穩定性：要求高、低濃度樣本在4~24 h內穩定�？疾鞙囟�、光照、空氣、酶解等因素。
    2、長(cháng)期低溫條件下的穩定性：從第一個(gè)樣本采集至最后一個(gè)樣本的分析為一個(gè)考察時(shí)間周期，貯存溫度一般為-20℃ ，如果需要也可在-70℃貯存。要求高、低濃度至少分別測定3次，測得結果與第一天測得的相應濃度比較應保持穩定。
    3、凍融試驗：取高、低濃度各3份于-20℃貯存24小時(shí)，取出后在室溫自然解凍，取樣測定，然后再將樣品放回冷凍12~24小時(shí)，如此重復循環(huán)二次以上，分別比較各次測定結果。 
    4、對照液和內標液的穩定性：室溫考察6小時(shí)穩定性，然后冷藏7~14天或恰當的周期后進(jìn)行測定，與新配溶液的測定結果進(jìn)行比較。
    對同一種樣品，用已證明有相當專(zhuān)屬性的分析方法與新建立的分析方法同時(shí)進(jìn)行測定，比較兩種分析方法測得結果的相關(guān)程度。通常用相關(guān)系數γ 表示，一般要求兩種方法的相關(guān)系數γ 在0.95以上。
    以上是我們對生物等效性試驗分析方法學(xué)評價(jià)方面的一些認識，希望對進(jìn)行此方面工作的人員有所幫助。