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生物芯片技術(shù)流程

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生物芯片技術(shù)流程

生物芯片技術(shù)不僅能夠提供極為豐富的信息,而且使用芯片的流程也不復雜。主要包括四個(gè)基本要點(diǎn):芯片方陣的構建、樣品的制備、生物分子反應和信號的檢測及分析。首先是準備好芯片和待檢測樣品。采用光導原位合成或微量點(diǎn)樣等方面,將大量生物大分子如核酸片段、多肽分子甚至組織切片、細胞等生物樣品有序地固化于支持物(如玻片、硅片、聚丙烯酰胺凝膠或尼龍膜等載體)的表面,組成密集二維分子排列,然后與已標記的待測生物樣品中靶分子雜交。如果是檢測表達譜,就需要從待檢測樣品mRNA或者total RNA中制備cDNA探針,與芯征雜交;如果是SNP檢測,則需要從待檢測樣品GenomicDNA中通過(guò)PCR制備探針。芯片雜交屬于固-液相雜交,與常規的Southern雜交相似,經(jīng)過(guò)高嚴謹度的洗滌后進(jìn)行結果檢測。制作者需要根據探針標記分子的種類(lèi)和芯片的規格來(lái)選擇檢測方法。對于Macroarrayg 一類(lèi)的膠膜芯片,可選擇同位素標記、化學(xué)發(fā)光法標記,檢測時(shí)需要X光片壓片曝光-顯影-掃描記錄,再選用相應的軟件進(jìn)行數據分析。條件較好的實(shí)驗室也可以選用磷屏成像系統代替X光片,直接成像并進(jìn)行定量分析。通過(guò)比較芯片上相同位置上的基因(即同一基因)在不同樣品的雜交信號,就可以得到這一基因在不同樣品中的表達信息。對于Microarray一類(lèi)的玻離片基芯片,通常使用的標記方法是熒光標記,通過(guò)特殊的芯片掃描儀掃描和相應的軟件進(jìn)行數據分析。
一些儀器| 電阻計| 電表| 鉗表| 高斯計| 電磁場(chǎng)測試儀| 電源供應器| 電能質(zhì)量分析儀| 多功能測試儀 

發(fā)布人:2010/5/12 10:07:001081 發(fā)布時(shí)間:2010/5/12 10:07:00 此新聞已被瀏覽:1081次